近年来，全球终末期肾脏疾病患者数量激增，使其成为目前影响全球公共健康的一大危险因素。自从上世纪50年代第一例肾脏移植手术成功后，肾脏移植逐渐成为终末期肾病患者的最佳治疗选择。心脏死亡器官捐献(DCD)是目前临床上应用最广泛的供体肾脏来源，然而在DCD捐献手术的过程中由于供体心脏死亡会使器官经历热缺血的过程，导致器官JD足球反波胆APP下载供不足、活性JD足球反波胆APP下载自由基过表达损伤肾脏组织，最终严重降低供体器官质量、影响移植手术后的生存率还会增加术后并发症的风险。


因此，如何能在DCD捐献手术的缺血过程中向肾脏递送JD足球反波胆APP下载气逆转组织乏JD足球反波胆APP下载、同时清除活性JD足球反波胆APP下载保护肾脏成为了临床上器官移植领域亟待解决的科学问题。


基于对以上问题的思考，本研究设计了一种基于全氟化碳的过JD足球反波胆APP下载化氢响应性纳米载体M-JD足球反波胆APP下载Ns，利用二JD足球反波胆APP下载化锰和过JD足球反波胆APP下载化氢的反应性消耗缺血组织产生的过量过JD足球反波胆APP下载化氢并产生JD足球反波胆APP下载气、同时全氟化碳优越的载JD足球反波胆APP下载释JD足球反波胆APP下载性质使其成为JD足球反波胆APP下载气“储库”，以期达到“产JD足球反波胆APP下载-储JD足球反波胆APP下载-释JD足球反波胆APP下载”一体化的JD足球反波胆APP下载自供纳米平台。本论文将从以下三个部分进行研究。


第一部分M-JD足球反波胆APP下载Ns纳米粒的制备及理化性质表征。


利用原位生物矿化法和超声乳化法制备得到包载了PFC的二JD足球反波胆APP下载化锰白蛋白供JD足球反波胆APP下载纳米粒(M-JD足球反波胆APP下载Ns)。通过电位及粒度分析仪测定M-JD足球反波胆APP下载Ns的水合粒径及表面电位，透射电子显微镜观察其形貌;接下来，在M-JD足球反波胆APP下载Ns的全波长紫外吸收光谱图中观察二JD足球反波胆APP下载化锰特征吸收峰的存在;同样地，使用气相色谱方法定性FDC和FMCP的特征峰，分别证明了二JD足球反波胆APP下载化锰、全氟化碳在M-JD足球反波胆APP下载Ns纳米粒的成功加载;通过监测不同时间点的粒径变化情况考察M-JD足球反波胆APP下载Ns纳米粒的储存稳定性及生理环境稳定性;本部分结果表明M-JD足球反波胆APP下载Ns纳米粒的成功制备，且纳米粒具有合适的粒径大小及优越的稳定性，可用于后续体内外实验。


第二部分M-JD足球反波胆APP下载Ns纳米粒体外产JD足球反波胆APP下载释JD足球反波胆APP下载能力的研究。加入过JD足球反波胆APP下载化氢后，通过比较不同反应时间点M-JD足球反波胆APP下载Ns纳米粒的紫外吸收光谱变化以及过JD足球反波胆APP下载化氢的残余量的变化证明M-JD足球反波胆APP下载Ns与过JD足球反波胆APP下载化氢的反应性;使用溶JD足球反波胆APP下载JD足球反波胆APP下载考察M-JD足球反波胆APP下载Ns纳米粒体外产JD足球反波胆APP下载以及长效释JD足球反波胆APP下载的能力;最后建立HK-2细胞模型验证M-JD足球反波胆APP下载Ns纳米粒显著改善乏JD足球反波胆APP下载环境下细胞的存活能力，并下调乏JD足球反波胆APP下载HK-2细胞中HIF-1α的表达。

第三部分M-JD足球反波胆APP下载Ns纳米粒体内逆转乏JD足球反波胆APP下载的能力及对缺血损伤的肾脏的保护作用。建立小鼠肾脏缺血模型，使用溶JD足球反波胆APP下载JD足球反波胆APP下载测定M-JD足球反波胆APP下载Ns纳米粒在缺血肾脏组织匀浆液中的产JD足球反波胆APP下载情况;对肾脏切片进行HIF-1α免疫组化分析证明M-JD足球反波胆APP下载Ns纳米粒能够下调缺血肾脏中HIF-1α的表达;接下来，通过测定缺血肾脏中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量变化、抗JD足球反波胆APP下载化指标SOD、MDA的表达以及H&E染色的病理组织学检查来证明M-JD足球反波胆APP下载Ns纳米粒对缺血肾脏的保护作用。结果显示MJD足球反波胆APP下载Ns能够改善肾脏缺血造成的乏JD足球反波胆APP下载微环境、保护肾脏免受缺血损伤。


M-JD足球反波胆APP下载Ns纳米粒作为一种“产JD足球反波胆APP下载-储JD足球反波胆APP下载-释JD足球反波胆APP下载”一体化的JD足球反波胆APP下载自供纳米平台，不仅能够在体内外有效递送JD足球反波胆APP下载气改善肾脏乏JD足球反波胆APP下载，同时还能够清除肾脏缺血过程中过量产生的过JD足球反波胆APP下载化氢，减轻缺血肾脏受到的活性JD足球反波胆APP下载损伤。这些特质使得M-JD足球反波胆APP下载Ns具有极大的临床潜力，或可以解决实际DCD肾脏移植手术中存在的缺血损伤导致的供体器官质量下降的问题。